單核-巨噬細胞包括骨髓中的前單核細胞、外周血中的單核細胞、以及組織內的巨噬細胞(Mφ)。Mφ來源于血液中的單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。單核細胞是一種單個核的吞噬細胞，來源于骨髓髓樣祖細胞，主要分布于血液循環(huán)系統(tǒng)，參與機體免疫應答和炎癥反應。單核細胞可分為經典型(CD14++CDI6-)、中間型(CD14++CD16+)和非經典型(CD14+CD16++)單核細胞。單核細胞表型分析，建議通過流式細胞術對循環(huán)單核細胞進行亞群分析。
正常情況下，根據外周血單核細胞表面標志物CD14和CD16的表達水平，單核細胞被劃分為三個主要亞群：經典單核細胞（cMo，特征為CD14++CD16-），中間型單核細胞（iMo，表現為CD14++CD16+），以及非經典或異型單核細胞（ncMo，通常定義為CD14-low/NEGCD16+）。在健康人中，cMo約占單核細胞總數的大約85%，而iMo占比約為5%，ncMo則大約占剩余的10%左右。
人，單核細胞可以根據表面CD14和CD16被細分為三個主要的亞群：
經典單核細胞（CD14hiCD16-）：約90%的單核細胞屬于這一類，具有高CD14但不表達CD16。
中間單核細胞CD14hiCD16+）：高CD14和低CD16表達。
非經典單核細胞（CD14-/lowCD16+）：具有相對較低CD14表達和高CD16。
小鼠，單核細胞根據表面標志和功能特性被分為兩種主要類型：
經典單核細胞：Classical Monocytes (CM)，（高表達Ly6C）：通過CCR2受體響應CCL2（趨化因子），主要參與炎癥反應，在組織損傷或感染時大量募集。
非經典單核細胞： NonClassical Monocytes（NCM），（低表達Ly6C）：又被稱為巡邏型單核細胞，高表達CX3CR1受體，主要在血管壁內爬行和監(jiān)視微環(huán)境，對組織修復和抗炎具有重要作用。
我們在清除單核巨噬細胞時，早期使用抗體CCR2，后來使用CD11b-DTR小鼠，再后來上世紀90年代末荷蘭免疫學家Nico VonRoojen教授開發(fā)了單核巨噬細胞清除劑Clodronate Liposomes氯膦酸鹽鹽脂質體（商業(yè)化的荷蘭Liposoma品牌）。荷蘭Liposoma品牌Clodronate Liposomes氯膦酸鹽鹽脂質體頻頻見刊于Cell，Nature和Science。但是這三種方法，對單核細胞的清除，有哪些差異呢？作為一個基礎研究，對我們設計實驗和選擇試劑很重要。尤其現在的研究，顆粒度和精準度越來越高，簡單的黑盒實驗，不能細分到具體的細胞亞群清除的差異，因此，我們可以參考JCI的這篇文獻。
論文信息：
論文題目： Spleen-derived classical monocytes mediate lung ischemia-reperfusion injury through IL-1β
期刊名稱：J Clin Invest.
時間期卷：2018;128(7):2833–2847
在線時間：2018年5月21日
DOI：doi.org/10.1172/JCI98436.
Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質體產品信息：
貨號：CP-005-005
規(guī)格：5ml+5ml
品牌：Liposoma
產地：荷蘭
名稱：Clodronate Liposomes and Control Liposomes
辦事處：Target Technology（靶點科技）
正常小鼠，靜脈注射Clo-lip（Clodronate Liposomes，荷蘭Liposoma），腹腔注射DT（Listlabs），靜脈注射抗體CCR2。24小時后取樣外周血和脾臟。如下圖。
外周血：Clodronate Liposomes和DT，無論對于經典單核細胞和非經典單核細胞，都有顯著效果。尤其荷蘭Liposoma的Clodronate Liposomes，幾乎將Ly6C陽性的細胞都清除了。CCR2抗體主要清除類似招募的CM。
脾臟：CCR2抗體的清除效果模式類似外周血。荷蘭Liposoma的Clodronate Liposomes的脾臟NCM清除效果也很顯著。
對于這個數據，我們需要辯證的看。首先是注射方式，其次是注射劑量，還有取樣方法。此外，取樣時間點，選擇的Marker，還有樣品制備的方法，這些細節(jié)，都很重要。都是我們自己的數據和別人數據不一樣的原因。別的數據僅僅是參考，需要我們自己做出來，才是自己的。才有助于進一步推進自己的實驗。
